免疫磁珠分離技術(shù)及應(yīng)用
一、前沿
免疫磁珠分離技術(shù)(Immunomagnetic beads sep—aration techniques,IMB) 是將免疫學(xué)反應(yīng)的高度特異性與磁珠特有的磁響應(yīng)性相結(jié)合的一種新的免疫學(xué)技術(shù);是一種特異性強、靈質(zhì)純化敏度高的免疫學(xué)檢測方法和抗原純化手段。是近年來國內(nèi)外研究較多的一種新的免疫學(xué)技術(shù)。
目前該項技術(shù)在細胞分離、蛋白、免疫學(xué)及微生物學(xué)檢測等方面均取得了較大的進展,是目前最有推廣價值的技術(shù)之一。
二、免疫磁珠分離技術(shù)介紹
1、免疫磁珠分離技術(shù)原理
利用人工合成的內(nèi)含鐵成分,可被磁鐵磁力所吸引,外有功能基團,可結(jié)合活性蛋白質(zhì)(抗體)的磁珠,作為抗體的載體。當(dāng)磁珠上的抗體與相應(yīng)的微生物或特異性抗原物質(zhì)結(jié)合后,則形成抗原-抗體-磁珠免疫復(fù)合物,這種復(fù)合物具有較高的磁響應(yīng)性,在磁鐵磁力的作用下定向移動,使復(fù)合物與其他物質(zhì)分離,而達到分離、濃縮、純化微生物或特異性抗原物質(zhì)的目的。
2、免疫磁珠法分類
⑴、陽性分離法
磁珠結(jié)合的細胞就是所要分離獲得的細胞
⑵、陰性分離法
磁珠結(jié)合不需要的細胞,游離于磁場的細胞為所需細胞。一般而言,陰性分離法的磁珠用量比陽性分離法的大,陽性分離法用的更多。磁性微珠是以金屬離子為核心,外層均勻包裹高分子聚合體的固相顆粒。磁性微珠上既可標記針對某種細胞表面抗原的特異性抗體(直接法); 也可標記羊抗鼠IgG抗體(間接法),使分離細胞的范圍大大擴大。
3、免疫磁性微球的制備
基本技術(shù)路線:制成磁性材料的微球,再在微球表面引入活性基團,通過載體表面偶聯(lián)反應(yīng)可將抗體結(jié)合到載體上,形成免疫磁性微球。
優(yōu)質(zhì)微載體的性能:合適且均一的磁響應(yīng)強度,較小且均一的粒徑,穩(wěn)定均一、特異吸附的表面性能。
4、該技術(shù)的主要優(yōu)點
5、用于分型
免疫磁珠法可被應(yīng)用于臨床器官移植供受者的快速選配。在高梯度磁場下,用免疫磁珠法分離靜脈或腹腔血中T、B淋巴細胞,并利用分離的淋巴細胞進行HLA-ⅠⅡ類抗原分型。如采用磁珠技術(shù)和單抗試劑建立起可在1.5h完成HLA-ⅠⅡ類抗原一類分型的新方法,還可應(yīng)用免疫磁珠分離技術(shù)進行腎移植供受體的HLA分型、探討血液病患者反復(fù)血小板輸注的治療效果與HLA之間的相關(guān)性。
6、用作靶向釋藥系統(tǒng)的載體
免疫磁性微球作為靶向釋藥系統(tǒng)的載體可使免疫磁性微球上的抗癌藥物更易與癌細胞接觸,服用這種制劑后,在體外適當(dāng)部位用一適宜強度的磁鐵,將磁性微球引導(dǎo)到體內(nèi)特定靶區(qū),提高了殺傷癌細胞的效果。很多研究者使用不同的方法制成了針對不同癌細胞的免疫磁性微球,作為靶向釋藥系統(tǒng)的載體并在實驗中證實這種釋藥載體具有良好的功效。