抗體制備服務(wù)內(nèi)容
Bioss可提供兔、小鼠、大鼠、羊、狗等多種動(dòng)物種屬的多克隆抗體制備服務(wù)（點(diǎn)擊填寫(xiě)申請(qǐng)表）以及小鼠單克隆抗體制備服務(wù)（點(diǎn)擊填寫(xiě)申請(qǐng)表）。
1、客戶提供抗原，抗原可包含：天然蛋白、重組蛋白、細(xì)胞或細(xì)胞提取液、病毒或病原體、菌種或菌體蛋白、小分子多肽、化合物；其中小分子多肽和化合物等半抗原免疫前需偶聯(lián)載體蛋白。
2、客戶僅提供蛋白名稱、GeneID、核酸序列、氨基酸序列等信息，我公司根據(jù)客戶的實(shí)驗(yàn)需求設(shè)計(jì)抗原，合成多肽抗原或表達(dá)蛋白抗原，免疫動(dòng)物制備抗體。
單克隆抗體/多克隆抗體制備服務(wù)項(xiàng)目差異
單克隆抗體/多克隆抗體
利用生物體對(duì)抗原物質(zhì)產(chǎn)生免疫應(yīng)答并產(chǎn)生抗體的機(jī)制，選用特定抗原物質(zhì)對(duì)機(jī)體持續(xù)刺激使其產(chǎn)生大量特異性抗體，之后收集純化得到針對(duì)特定抗原的特異性抗體， 這一過(guò)程就是抗體制備。 抗體制備主要步驟包括：獲得理想免疫原、免疫動(dòng)物、分離血清和純化抗體，這樣得到的抗體即稱為多克隆抗體 ；而單克隆抗體是通過(guò)經(jīng)典的雜交瘤細(xì)胞技術(shù)，在小鼠免疫后，將分泌抗體的B淋巴漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，使得B淋巴漿細(xì)胞獲得永生化。再通過(guò)有限稀釋法將融合細(xì)胞單克隆化，利用包被相應(yīng)抗原的96孔板對(duì)細(xì)胞上清進(jìn)行篩選，上清中有相應(yīng)抗體，則呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果。將陽(yáng)性孔所對(duì)應(yīng)的雜交瘤細(xì)胞株挑出，即為所獲得的單克隆細(xì)胞株。單克隆細(xì)胞株可通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)或小鼠腹水的方式擴(kuò)大生產(chǎn)單克隆抗體。
單克隆抗體/多克隆抗體制備差異
抗體的制備，無(wú)論是單抗還是多抗，其前期的動(dòng)物免疫步驟是完全相同的，差異僅僅在篩選。或者說(shuō)，單抗是在多抗制備的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步篩選并穩(wěn)定表達(dá)特異單克隆細(xì)胞株的結(jié)果。當(dāng)抗原免疫動(dòng)物后，在淋巴結(jié)和脾等淋巴器官內(nèi)通過(guò)一系列抗原處理和遞呈，促使B淋巴漿母細(xì)胞 (Plasmablasts, PBs)分化成熟，在轉(zhuǎn)錄水平成為分泌特異抗體的B淋巴漿細(xì)胞 (Plasma cells, PCs)，大量不同的漿細(xì)胞會(huì)分泌不同的針對(duì)抗原的抗體。由此，可以說(shuō)每一個(gè)B漿細(xì)胞都成為一株單克隆抗體的候選者。 傳統(tǒng)的單克隆抗體制備就是通過(guò)將小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞系融合，篩選能夠分泌特異抗體并穩(wěn)定傳代的融合細(xì)胞株而實(shí)現(xiàn)的。而多克隆抗體（多抗）的制備就是從血清中分離純化所有的未經(jīng)篩選的單克隆抗體。從以上過(guò)程可以看出，無(wú)論是單抗還是多抗制備方法，其針對(duì)靶點(diǎn)（抗原）的特異性抗體的產(chǎn)生主要源于被免疫動(dòng)物自身的漿細(xì)胞分化成熟。 不同在于，多克隆抗體猶如許多單克隆抗體的集合，它們有的特異性高，有的特異性低，總體特異性符合正態(tài)分布曲線的形式（如下圖），而其特異性的總體表現(xiàn)也應(yīng)處于統(tǒng)計(jì)學(xué)正態(tài)曲線中位線 (MID)的水平。而單抗制備后續(xù)的篩選過(guò)程，可去除大部分的非特異抗體，保留幾株特異性較好的單克隆抗體。
單抗與多抗特異性示意圖
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單克隆抗體 |
多克隆抗體 |
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制備周期 |
5-6個(gè)月 |
2-3個(gè)月 |
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技術(shù)要求 |
高 |
低 |
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產(chǎn)量 |
高 |
低 |
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價(jià)格 |
高 |
低 |
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對(duì)免疫原要求 |
較高 |
高 |
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特異性 |
高 |
高（抗原親和純化） |
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識(shí)別表位 |
一個(gè) |
多個(gè) |
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非特異結(jié)合 |
較少 |
較多 |
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靈敏度 |
較高 |
高 |
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標(biāo)準(zhǔn)化 |
易，批間差小 |
較難，批間差大 |
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穩(wěn)定性 |
較好 |
好 |
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凝集反應(yīng) |
大多數(shù)沒(méi)有 |
有 |
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沉淀反應(yīng) |
大多數(shù)沒(méi)有 |
有 |
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中和活性 |
大多數(shù)沒(méi)有 |
有 |
