COVID-19的全球大流行對準(zhǔn)確快速的診斷測試提出了迫切的需求。相比于核酸檢測，免疫學(xué)檢測具有成本低廉、簡便快捷的特點，更適合現(xiàn)場快檢和POCT(point-of-care testing)診斷方式的開發(fā)。免疫學(xué)方法對新冠病毒SARS-CoV-2檢測的特異性和靈敏度基于特異性抗體的制備、優(yōu)化以及抗體對的配對篩選。眾所周知，抗體對由捕獲抗體和檢測抗體配對組成。性能優(yōu)秀的抗體對也是開發(fā)SARS-CoV-2的快速診斷盒的前提。利用側(cè)向流動免疫分析(LFA)技術(shù)，可以高通量篩選抗SARS-CoV-2核衣殼蛋白(Nucleocapsid Protein, NP)抗體對，是一種高效篩選鑒定SARS-CoV-2抗體對的方法。
近期，化學(xué)預(yù)印本刊登了一篇由美國全球健康實驗室發(fā)表的文章：Antibody Screening Results for Anti-Nucleocapsid Antibodies Towards the Development of a SARS-CoV-2 Nucleocapsid Protein Antigen Detecting Lateral Flow Assay。測試者將21種不同公司來源的抗SARS-CoV-2核衣殼蛋白抗體進行隨機組合，配對為673對抗體對，然后分別在捕獲能力和檢測能力方面進行了測試，目的是找到那些對SARS-CoV-2核衣殼蛋白的獨特表位具有最大親和力，同時在LFA中表現(xiàn)最佳的抗體對。與傳統(tǒng)的抗體篩選方法（如ELISA、生物層干涉法）相比，文章所述的方法不僅用到了實時LFA反應(yīng)動力學(xué)，并且直接在NC膜上進行測試，能對抗體對的表現(xiàn)進行實時、直觀的判斷。文章確定了幾對候選抗體，這些抗體對在對純化的SARS-CoV-2核衣殼蛋白和COVID-19臨床樣本的檢測中性能突出，適合進一步開發(fā)針對SARS-CoV-2的快速診斷盒。
該文第一輪篩選所用的單體核衣殼蛋白由大腸桿菌表達，而之后的三輪篩選所用的核衣殼蛋白由HEK293真核細胞表達，具有完整的糖基化修飾，因此最接近受感染的人類細胞所表達的病毒蛋白。從圖中可以看出，在后三輪測試中，不管是用做捕獲試劑還是檢測試劑，Bioss的幾種核衣殼蛋白抗體都表現(xiàn)不俗。尤其在第三輪，TOP5的每一對抗體對中都能找到Bioss抗體的身影。四輪測試后，發(fā)現(xiàn)第33對和第70對抗體組合重復(fù)出現(xiàn)在多輪篩選的前五名（見圖一）。
圖一
文章測試篩選了673對抗SARS-CoV-2核衣殼蛋白抗體，并進行了綜合排名，Bioss的多個抗體產(chǎn)品躋身TOP10（見圖二）。未來有希望利用這些排名靠前的候選抗體來開發(fā)用于檢測SARS-CoV-2的快速診斷試劑盒。
圖二
雖然文章篩選的抗體為SARS-CoV-2的研究診斷邁出了堅實的一步，但對于不同的檢測平臺，仍需要更多的科研工作者進行開發(fā)測試。
本次研究中用到的Bioss全部抗體產(chǎn)品
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產(chǎn)品名稱 Anti-SARS-CoV-2(2019-nCoV)Nucleocapsid |
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| 貨號 | 交叉物種 | 亞型 | 克隆號 |
| bsm-41411M |
Mouse |
IgG2b |
1C7 |
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bsm-41412M |
Mouse | IgG2b | 7A7 |
| bsm-41413M | Mouse | IgG2b | 6A8 |
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bsm-41414M |
Mouse | IgG2b | 7E1B |
| bsm-41415M | Mouse | IgG2b | 14B2D |
