文章信息
IF=14.919
引用產(chǎn)品：bs-0979R（Rabbit Anti-CD38）
Sample：Rat
Application：IF
文章作者及單位：王金鳳 中國(guó)科學(xué)院北京生命科學(xué)研究院
文章摘要
研究背景
人體不同系統(tǒng)內(nèi)微生物群并不是彼此分離。異源細(xì)菌可能普遍傳播和定植于另一個(gè)組織或器官，刺激炎癥并增加癌癥等疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。以往存在許多微生物交叉定植的例子，例如共生細(xì)菌可從其他部位傳播到孕婦子宮腔及胎兒體內(nèi)，以及由于腸道細(xì)菌易位到胎盤而誘發(fā)先兆子癇。普遍認(rèn)為胃酸可以阻止口腔與腸道之間有效微生物通訊和易位，但近期已證實(shí)口腔細(xì)菌可頻繁通過消化道遷移到腸道。在胰腺癌和結(jié)腸直腸癌中均觀察到特定口腔細(xì)菌如核梭桿菌的富集。
類似胃液和宮頸粘液，可以阻礙微生物在口腔與腸道、子宮腔與陰道之間自由通過。而當(dāng)前高遷移率子宮微生物和細(xì)菌物種的來源被廣泛關(guān)注。與陰道微生物群相反，目前仍對(duì)子宮腔內(nèi)微生物群缺乏了解。據(jù)報(bào)道女性上生殖道中可能普遍存在活菌，其中包括子宮在內(nèi)。關(guān)于微生物類群，主要在同一個(gè)體生殖道的不同部分之間共享，這表明從陰道到腹膜，微生物群逐漸變化，據(jù)推測(cè)女性下生殖道或腹膜液中微生物可轉(zhuǎn)移至上生殖道中。
各類乳酸桿菌是健康育齡女性陰道中的主要細(xì)菌，其產(chǎn)生的乳酸可維持陰道環(huán)境低pH值，抑制有害菌生長(zhǎng)，使微生態(tài)保持相對(duì)平衡的狀態(tài)。而在異常情況下，陰道乳酸桿菌豐度可能顯著降低，導(dǎo)致pH升高。pH值升高會(huì)導(dǎo)致有害細(xì)菌如加德納菌和普雷沃氏菌的增殖，從而導(dǎo)致微生態(tài)失調(diào)以及相關(guān)疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的增加，包括細(xì)菌性陰道病和尿路感染。同樣子宮微生物群的改變與各種宮內(nèi)疾病密切相關(guān)，如子宮內(nèi)膜異位癥，子宮內(nèi)膜息肉和子宮內(nèi)膜癌，甚至可能影響子宮內(nèi)膜對(duì)胚泡的接受性。由此可見，陰道和子宮微生物群的生態(tài)穩(wěn)定性對(duì)女性生殖系統(tǒng)的健康起著重要作用。理論上，子宮腔和陰道在生理上是相鄰的，陰道細(xì)菌有機(jī)會(huì)通過子宮頸向上遷移至子宮。以往研究推測(cè)宮內(nèi)感染是由陰道細(xì)菌上升到宮腔引起的，但這兩個(gè)部位之間的微生物交流仍不清楚，當(dāng)陰道細(xì)菌轉(zhuǎn)移到上生殖系統(tǒng)時(shí)，子宮內(nèi)微生物群調(diào)節(jié)和疾病誘發(fā)的機(jī)制仍然模糊不清。
研究結(jié)果（一）
陰道擾動(dòng)引起的子宮微生態(tài)失調(diào)
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：
本實(shí)驗(yàn)隨機(jī)選擇健康、患有慢性子宮內(nèi)膜炎和細(xì)菌性陰道病的女性各10名，并對(duì)其進(jìn)行陰道灌洗，將灌洗液移植到已接受1周抗生素治療的SD大鼠(n=10)陰道中。移植后每天一次（連續(xù)3周）進(jìn)行qPCR和ELISA實(shí)驗(yàn)，治療結(jié)束后進(jìn)行顯微鏡學(xué)觀察、TNF-α和CD38免疫熒光實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
在慢性子宮內(nèi)膜炎患者陰道菌群移植的大鼠中，TNF-α、CD38、IL1β等細(xì)胞因子和炎性因子的mRNA表達(dá)水平比移植健康組和對(duì)照組的微生物群顯著升高。細(xì)菌性陰道病組中細(xì)胞因子水平也有所升高但低于慢性子宮內(nèi)膜炎組，該結(jié)果反映子宮內(nèi)膜炎患者陰道微生物群可有效刺激子宮炎癥。慢性子宮內(nèi)膜炎組大鼠子宮體水腫增大，表現(xiàn)為多發(fā)點(diǎn)狀炎性病變(5×視野)，子宮內(nèi)膜增生(25×)和多核細(xì)胞增多(50×)。免疫熒光檢測(cè)結(jié)果顯示，與健康組和對(duì)照組相比，慢性子宮內(nèi)膜炎組的子宮內(nèi)膜組織中存在TNF-α和CD38信號(hào)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
慢性子宮內(nèi)膜炎女性陰道微生物群可引起子宮腔炎癥，可能由細(xì)菌易位或炎癥因子引起，這些因子可穿過宮頸屏障進(jìn)入子宮腔。
陰道細(xì)菌對(duì)子宮內(nèi)膜的破壞及保護(hù)作用
作者為研究某些陰道細(xì)菌遷移對(duì)子宮腔的影響及其對(duì)子宮炎癥的刺激，將單個(gè)細(xì)菌移植到陰道中以建立宮內(nèi)炎癥模型。像普氏菌和梭狀芽孢桿菌為建模的理想菌種，可在子宮內(nèi)膜炎患者子宮或陰道微生物群中富集，并在不同身體部位表現(xiàn)出協(xié)同變異。作者通過基因測(cè)序等數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜炎組的普氏菌與梭狀芽孢桿菌更豐富。普氏菌，最初是從子宮內(nèi)膜分離出來的一種菌屬；產(chǎn)氣莢膜梭菌曾用于構(gòu)建子宮內(nèi)膜炎模型，以上兩種菌屬將用于以下陰道移植實(shí)驗(yàn)。
作者推測(cè)陰道中可能存在某些細(xì)菌可通過逆轉(zhuǎn)二路普氏菌或產(chǎn)氣莢膜梭菌炎癥作用而發(fā)揮保護(hù)作用。鑒于健康女性子宮和陰道微生物組中乳酸桿菌相對(duì)豐度顯著高于子宮內(nèi)膜炎患者，故作者選擇鼠乳桿菌評(píng)估其對(duì)SD大鼠子宮內(nèi)膜健康的保護(hù)作用。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：
處理組：
將生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)期的二路普氏菌每日一次（持續(xù)3周）注射到SD大鼠陰道中，注射完成3天后收集宮內(nèi)組織和子宮陰道灌洗液樣品，同時(shí)對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌也進(jìn)行相同的移植程序。干預(yù)組：普氏菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌每周四次（持續(xù)三周）移植到陰道中以誘導(dǎo)子宮腔炎癥。同時(shí)將鼠乳桿菌移植到陰道內(nèi)一次，在每?jī)纱萎a(chǎn)氣莢膜梭菌處理后交替補(bǔ)充，使得產(chǎn)氣莢膜梭菌和鼠乳桿菌分別每周移植到陰道中四次和兩次。為驗(yàn)證陰道中細(xì)菌代謝物是否也可以引起子宮炎癥，作者增加移植一組產(chǎn)氣莢膜梭菌上清液，該處理與產(chǎn)氣莢膜梭菌組相似，不同之處在于活細(xì)菌被其培養(yǎng)液的上清液代替，干預(yù)3周。進(jìn)行顯微鏡學(xué)觀察、免疫熒光、熒光原位雜交及基因測(cè)序。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
處理組結(jié)果：與對(duì)照組相比，處理組宮內(nèi)組織炎癥因子水平，子宮體直徑，宮腔和陰道細(xì)菌生物量均顯著增加，且以上指標(biāo)之間存在顯著正相關(guān)，處理組大鼠子宮體表現(xiàn)出水腫增大；TNF-α和CD38抗體的組織切片和免疫熒光結(jié)果表現(xiàn)多發(fā)點(diǎn)狀炎癥和子宮內(nèi)膜增生；熒光原位雜交結(jié)果顯示子宮腔內(nèi)細(xì)菌總數(shù)與移植細(xì)菌種類生物量均成較高趨勢(shì)。干預(yù)組結(jié)果：僅移植產(chǎn)氣莢膜梭菌的大鼠宮腔組織炎癥因子、子宮體直徑、宮腔陰道細(xì)菌量明顯增高。且鼠乳桿菌移植組和產(chǎn)氣莢膜梭菌上清液組之間沒有顯著差異。通過基因測(cè)序，顯示移植產(chǎn)氣莢膜梭菌的子宮腔內(nèi)有更多的梭菌。產(chǎn)氣莢膜梭菌陰道移植大鼠的子宮微生物組中發(fā)現(xiàn)有類桿菌屬和普氏菌的富集，而雙歧桿菌則呈現(xiàn)相反的趨勢(shì)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
陰道中的細(xì)菌可以上升到子宮腔中定殖、生長(zhǎng)引起炎癥，但若僅通過將其代謝物釋放到陰道中則不能達(dá)到相同水平的刺激。鼠乳桿菌可以抑制陰道產(chǎn)氣莢膜梭菌的生長(zhǎng)并減少子宮產(chǎn)氣莢膜梭菌和其他有害菌生物量，因此可能在減少子宮炎癥中起保護(hù)作用。
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