免疫分型 (immunophenotyping) 是指根據(jù)存在于細(xì)胞表面、核或細(xì)胞質(zhì)中的標(biāo)記物或抗原的類型，利用基于抗體的對異質(zhì)細(xì)胞群進行分析，以鑒定多種目標(biāo)細(xì)胞群的存在及比例。通過使用特異性識別不同細(xì)胞類型標(biāo)記物或抗原的抗體，從而幫助鑒定細(xì)胞的譜系。例如腫瘤標(biāo)志物的檢測、浸潤免疫細(xì)胞的分析、白血病的診斷等。免疫分型可以利用組織切片（新鮮或固定組織）通過免疫組化方法以及利用細(xì)胞懸液通過流式細(xì)胞術(shù)進行分析。
流式細(xì)胞術(shù)可以說是用于探測人類免疫表型的首選技術(shù)，特別是由于它可以在諸如血液的復(fù)雜混合物中通過測量許多單個細(xì)胞上的多個參數(shù)，從而鑒定和分析包括稀有亞群在內(nèi)的許多細(xì)胞亞群。并且由于可用的抗體試劑的擴大和實驗方案的不斷調(diào)整，流式細(xì)胞術(shù)不僅可用于評估細(xì)胞表面蛋白的表達，還可以用于評估胞內(nèi)蛋白的表達或修飾水平以及細(xì)胞因子的水平。
使用細(xì)胞表面標(biāo)記的特定組合對免疫細(xì)胞亞群進行定義是一個不斷發(fā)展的過程，特別是那些高頻研究的細(xì)胞類型。這些類型包括調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)、分泌IL-17的T輔助細(xì)胞(Th17)、樹突狀細(xì)胞(DC) 和自然殺傷細(xì)胞(NK)。盡管新標(biāo)記的發(fā)現(xiàn)和新的細(xì)胞子集將在未來一段時間內(nèi)持續(xù)下去，然而，我們還是希望細(xì)胞免疫學(xué)領(lǐng)域具有足夠的成熟程度，以達到對大多數(shù)共同研究的免疫細(xì)胞亞群的定義達成共識。換句話說，應(yīng)當(dāng)能夠定義一種相對穩(wěn)定的標(biāo)記集合，其描繪T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核細(xì)胞和DC細(xì)胞等主要類型。因此，我們通過總結(jié)文獻確定各個細(xì)胞類型的關(guān)鍵分化標(biāo)記，并且總結(jié)目前用于人體免疫監(jiān)測的標(biāo)準(zhǔn)化免疫表型分型組合。
T細(xì)胞
T淋巴細(xì)胞可在CD3表達的基礎(chǔ)上被免疫表型化，隨后進一步細(xì)分（如CD8+殺傷性T細(xì)胞和CD4+輔助性T細(xì)胞）。此外，T細(xì)胞表型是靈活的，可以隨不同的微環(huán)境發(fā)生變化；表型也可能重疊在多個T細(xì)胞群體之間。此外，T細(xì)胞亞群的分類還可能是根據(jù)響應(yīng)某些刺激或磷酸化免疫信號蛋白（如STAT蛋白）而分泌的特定細(xì)胞因子水平來確定。
殺傷性T細(xì)胞（又被稱作細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞，CD8+）能識別抗原，這些抗原是由感染因子釋放的，并與宿主細(xì)胞結(jié)合。殺傷性T細(xì)胞能夠識別多種細(xì)胞類型和病原體并與之相互作用。T細(xì)胞受體與外源抗原結(jié)合，觸發(fā)細(xì)胞毒素向受感染細(xì)胞釋放，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。殺傷性T細(xì)胞的主要鑒定標(biāo)志物就是CD8+，但是如果需要根據(jù)不同生理狀態(tài)下對殺傷性T細(xì)胞進行功能鑒定，還可以進一步增加其他標(biāo)志物形成標(biāo)志物組合。比如，對殺傷性T細(xì)胞進一步定義幼稚、中央記憶性、效應(yīng)記憶性和效應(yīng)T細(xì)胞亞群的經(jīng)典標(biāo)志物是基于趨化因子受體7(CCR7；也稱為CD197) 和CD45RA(或CD45RO) 的表達情況；對殺傷性T細(xì)胞進一步分析其活化狀態(tài)是基于HLA-DR和CD38的表達情況1-3。
輔助性T細(xì)胞(即Th1、Th2、Th9、Th17和Tfh細(xì)胞等) 具有很少的細(xì)胞毒性活性并且分泌對其它白細(xì)胞（例如B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞或中性粒細(xì)胞）起作用以清除病原體的細(xì)胞因子。除了CD4這一共有標(biāo)志物，不同輔助性T細(xì)胞還有各自的常用鑒定標(biāo)志物組合，如下圖所示：
調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（即Treg）在維持免疫穩(wěn)態(tài)中起著重要作用，并且也與許多自身免疫性疾病有關(guān)4。迄今為止，已確定了兩種主要類別的CD4+Treg：組成型表達CD25和FoxP3的天然Tregs(nTreg)以及誘導(dǎo)后激活表達CD25和FoxP3的誘導(dǎo)型Tregs(iTreg)5。人和小鼠Treg的CD25表達情況不同。在小鼠中，所有CD25+細(xì)胞都被認(rèn)為是Treg；而在人的免疫系統(tǒng)，只有那些高水平表達CD25的細(xì)胞被認(rèn)為是Treg6。
目前，F(xiàn)OXP3是Treg的最明確的標(biāo)記，盡管有報道發(fā)現(xiàn)少數(shù)Treg亞群是FOXP3-7。轉(zhuǎn)錄因子Foxp3作為Tregs的標(biāo)志又進一步推動了其他的Treg標(biāo)記的發(fā)現(xiàn)，包括CD127。若干已發(fā)表的報告證明CD127表達與Foxp3呈負(fù)相關(guān)8。比如，利用CD4+、CD25+和CD127-組合分選策略，可用于獲得體外可擴增的Treg細(xì)胞。
| 英文名稱 | 產(chǎn)品編號 | 應(yīng)用 | 文獻引用次數(shù) |
| BCL6B | bs-13606R | Elisa,IHC,IF,ICC | 1 |
|
CCR7 |
bs-1305R | WB,Elisa,IHC,FC,IF,ICC | 8 |
| bsm-51701M | WB | - | |
|
CD3 |
bs-10498R | Elisa,IHC,IF,ICC | 4 |
| bsm-30092M | FC | - | |
|
CD38 |
bs-0979R | WB,Elisa,IHC,FC,IF | 2 |
| bs-0980R | Elisa,IHC,FC,IF | - | |
| bs-24719R | WB,ELISA | - | |
|
CD3E |
bs-0765R | Elisa,IHC,FC,IF | 7 |
| bs-4815R | WB,Elisa,FC | 3 | |
|
CD4 |
bs-0647R | WB,Elisa,IHC,FC,IF | 11 |
| bs-0766R | WB,Elisa,IHC,FC,IF | 15 | |
| bs-22732R | WB | - | |
| bs-23536R | WB,FC | - | |
| bs-23539R | WB | - | |
| bs-4817R | WB | - | |
| bsm-30093M | FC | - | |
| bsm-33076M | FC | 2 | |
| bsm-52469R | WB,IHC,IF,ICC | - | |
| CD45RO | bs-1708R | Elisa,IHC,FC | 1 |
|
CD8 |
bs-0648R | WB,Elisa,IHC,IF | 50 |
| bs-10699R | WB,Elisa,IHC,FC,IF,ICC | 2 | |
| bs-22849R | WB | - | |
| bs-22852R | WB | - | |
| bs-23447R | WB,Elisa | - | |
| bs-23448R | WB,Elisa | - | |
| bs-4790R | WB,Elisa,IHC,FC,IF | 3 | |
| bsm-30094M | FC | - | |
| CD8 alpha | bs-4791R | WB,Elisa | 4 |
| CD8B | bs-4914R | WB,Elisa,IHC,IF,ICC | - |
|
FoxP3 |
bs-0269R | Elisa,IHC,FC,IF | 5 |
| bs-10211R | WB,Elisa,IHC,FC,IF,ICC | 6 | |
| bs-23074R | WB,Elisa,FC | - | |
| bsm-52079R | WB,IP,IHC,FC,IF,ICC | 1 | |
|
GATA3 |
bs-1452R | Elisa,IHC,FC,IF | 1 |
| bs-23118R | Elisa | - | |
| bsm-51575M | WB,FC,ICC | - | |
| HLA-DR | bsm-52535R | WB,IHC,ICC | - |
|
HLA-DR/HLA DRB1 |
bs-1198R | Elisa,FC | 3 |
| bs-22366R | WB | - | |
| CD127-APC | bsm-30089M-APC | WB,Elisa,IHC,FC,IF,ICC | - |
| IL2RA/CD25 | bs-0577R | WB,Elisa,FC | 3 |
|
IL-9 |
bs-10435R | Elisa,IHC,IF,ICC | 1 |
| bs-2428R | WB,Elisa,IHC,IF | 2 | |
|
ROR Gamma |
bs-3863R | WB,Elisa,IHC,FC,IF | 1 |
| bs-6217R | WB,Elisa,IHC,FC,IF,ICC | - | |
|
ROR Gamma T |
bs-10647R | WB,Elisa | - |
| bs-23109R | WB,Elisa | - | |
| bs-23110R | WB,Elisa,IHC,IF,ICC | 2 |
*產(chǎn)品信息以官網(wǎng)為準(zhǔn)：www.xucheq.com
參考文獻：
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2.Tussey L, et al. Eur. J. Immunol. 2000; 30:1823–1829.
3.Appay V, et al. Nature Med. 2002; 8:379–385.
4.Cools N, et al. Clin Dev Immunol. 2007;891-895.
5.Chatenoud L, Bach JF. J Clin Invest. 2006;116: 2325-2327.
6.Schmetterer, Klaus G. et al. The FASEB Journal. 26 (6): 2253–2276.
7.Otsubo K, et al. Clin Immunol. 2011 Oct;141(1):111-20.
8.Liu W, et al. J Exp Med. 2006;203:1701-1711.
