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重組乙肝病毒核心抗原（rHBcAg）、 重組乙肝病毒e抗原（rHBeAg）制備完成
發(fā)表者：北京博奧森生物 發(fā)表時(shí)間：2016-2-15
在我國，乙肝病毒感染及帶病毒者約占人群的十分之一，乙肝病毒可形成慢性感染，是肝癌和肝硬化的主要原因。乙肝病毒的外殼由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜及表面抗原覆蓋，它的里面含病毒的核殼體，由病毒的核心抗原及病毒DNA組成。核心抗原由兩個(gè)單體組成，每一個(gè)單體含183個(gè)氨基酸，前149個(gè)氨基酸與形成核心抗原的二聯(lián)體有關(guān)，后34個(gè)氨基酸主要為堿性氨基酸，與病毒DNA直接結(jié)合。
乙肝病毒核心抗原（rHBcAg）主要存在于病毒顆粒內(nèi)，在急性感染的早期即消失，抗核心抗原抗體產(chǎn)生于急性病毒感染，也見于帶病毒者，或康復(fù)期的病人。IgM抗核心抗體陽性表示急性感染，IgG抗核心抗體陽性表示曾有感染或慢性感染。
rHBcAg的應(yīng)用：rHBcAg由大腸桿菌表達(dá)，含183個(gè)氨基酸，分子量為２３kDa。
應(yīng)用：可用于臨床酶聯(lián)免疫檢測(cè)及蛋白質(zhì)電泳固相酶聯(lián)免疫檢測(cè)。
純化方法及純度：利用拄層析技術(shù)，12% SDS-PAGE檢測(cè)純度大于95%。
保存方法和穩(wěn)定性：存放在負(fù)20度，有效期兩年。
核心抗原溶液：含2M尿素，pH 7.40的50mM 磷酸鹽。
乙型肝炎e抗原（rHBeAg）是由HBVDNAC基因區(qū)編碼的一種非顆粒性的分泌型核殼蛋白,臨床上將其作為判斷HBV活動(dòng)性復(fù)制的指標(biāo)之一。HBeAg是重要的生物原材料,廣泛用于HBV感染者血清學(xué)檢測(cè)的相關(guān)診斷用品的制備，乙肝病毒的外殼由來自人體的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜及表面抗原覆蓋，它的里面含病毒的核殼體，它由病毒的核心抗原及病毒DNA組成。核心抗原基因可產(chǎn)生兩個(gè)不同的蛋白，一個(gè)是21.5-kDa的蛋白，含183個(gè)氨基酸可與病毒DNA結(jié)合，稱核心抗原；另一個(gè)為核心抗原的前體，該蛋白除了含與核心抗原相同的183個(gè)氨基酸外，在其起始處還有一段含29個(gè)氨基酸的多肽，核心抗原前體在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)修飾后，其N-端只保留了10個(gè)氨基酸，而C-端則去掉了34個(gè)與病毒DNA結(jié)合的堿性氨基酸，最后e抗原以這種形式被分泌出去。
核心抗原主要存在于病毒顆粒內(nèi)，在急性感染的早期即消失，抗核心抗原抗體產(chǎn)生于急性病毒感染，也見于帶病毒者，或康復(fù)期的病人。IgM抗核心抗體陽性表示急性感染，IgG抗核心抗體陽性表示曾有感染或慢性感染。
如果血清e(cuò)抗原陽性，表明該病毒有傳染他人的危險(xiǎn)，檢測(cè)e抗原還可指導(dǎo)治療，e抗原的消失表明治療的有效性。如果病人的抗e抗原陽性，則表明病人急性感染階段的結(jié)束，病毒的傳染性大大地降低。 rHBeAg的表達(dá)及應(yīng)用：rHBeAg由大腸桿菌表達(dá)，在起始密碼子前含有10個(gè)氨基酸，后面和含有149個(gè)氨基酸的多肽相連接，分子量為18 kDa。
該重組蛋白可用于臨床酶聯(lián)免疫檢測(cè)及蛋白質(zhì)電泳固相酶聯(lián)免疫檢測(cè)。
純化方法及純度：利用拄層析技術(shù)，12% SDS-PAGE檢測(cè)純度大于95%。
保存方法和穩(wěn)定性：存放在負(fù)20度，有效期兩年。
核心抗原溶液：含2M尿素，pH 7.40的50mM 磷酸鹽。
