研究背景
阿爾茨海默病 (Alzheimer’s Disease, AD) 是一種隱匿、緩慢的神經(jīng)退行性疾病，是老年失智癥中最為常見的一種，據(jù)估計約占總失智病例的60%—80%[1]。短期記憶障礙是AD最常見的早期癥狀，其標(biāo)志性的病理特征是大腦神經(jīng)元外部淀粉樣斑塊沉積和神經(jīng)元內(nèi)部tau蛋白過度磷酸化導(dǎo)致的神經(jīng)原纖維纏結(jié)。隨病程的發(fā)展，患者逐漸喪失溝通能力、判斷力、方向感和生活的自理能力，最終失去語言功能、活動能力和吞咽能力[1]。
截至2015年，全世界共4600萬人患有AD。預(yù)計到2050年，全球患病人數(shù)將增加到1.3億，總醫(yī)療成本超1萬億美元，意味著僅AD醫(yī)療護(hù)理費(fèi)用就可構(gòu)筑世界第18大經(jīng)濟(jì)體[2]。目前，我國現(xiàn)存AD患者已超過1000萬，并將保持較快增長。而預(yù)計到2030年，我國AD患者人數(shù)將達(dá)到約1600萬。我國已成為受AD影響程度最大的國家。因此，深入研究AD病因和病理機(jī)制，加速開發(fā)有效的AD預(yù)防和診療方案，已成為我國乃至全世界神經(jīng)科醫(yī)生和生物醫(yī)藥企業(yè)的一項重要任務(wù)。
圖 1. 阿爾茨海默病的全球影響[2]
AD的發(fā)病具隱匿性，在確診之前通常已經(jīng)經(jīng)歷了15-20年，甚至是更長時間的發(fā)展，這一階段被稱為AD的“前臨床期”[3]。隨著病程不斷發(fā)展，患者發(fā)生“輕度認(rèn)知障礙期” (Mild Cognitive Impairment, MCI) ，此時患者出現(xiàn)癥狀并進(jìn)行性加重，逐步發(fā)展到“輕度癡呆期”、“中度癡呆期”和“重度癡呆期” [4-7]。由于早期癥狀缺乏特異性，臨床上對AD患者很難做到早發(fā)現(xiàn)、早治療。AD最終會是致命的，多數(shù)患者確診后的預(yù)期壽命僅有4-8年。
圖 2. 阿爾茨海默病的病程[1]
近年來，關(guān)于AD的研究日益深入，尤其是腦脊液(Cerebrospinal Fluid, CSF) 標(biāo)志物和影像學(xué)檢查手段的進(jìn)展，有效地提高了AD診斷的準(zhǔn)確性。國家衛(wèi)健委辦公廳發(fā)布了《阿爾茨海默病的診療規(guī)范 (2020年版) 》：建議對于疑似病患進(jìn)行一系列臨床評估，包含生物標(biāo)志物的檢查：腦脊液中β淀粉樣蛋白42 (Beta-Amyloid (1-42) , Aβ42) 水平下降，總Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白 (phospho-Tau,p-Tau) 水平升高。
《阿爾茨海默病的診療規(guī)范 (2020年版) 》
標(biāo)志物分析
AD生物標(biāo)志物水平的改變常發(fā)生于前臨床期。除影像學(xué)檢查外，CSF生化分析也是AD篩查的常用手段[1]。相當(dāng)多AD患者CSF檢查可發(fā)現(xiàn)可溶性β-淀粉樣蛋白 (β-Amyloid, Aβ)，特別是Aβ42的含量下降，而總Tau和p-Tau含量上升。CSF神經(jīng)絲輕鏈蛋白 (Neurofilament Light-chain, NF-L) 是一種新興的生物標(biāo)志物。NF-L在生理條件下分布于神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)部。因此，釋放到CSF中NF-L的異常增加被認(rèn)為可以用來指示所造成神經(jīng)細(xì)胞變性[8,9]的原因。
由于血腦屏障的存在，大腦中的生物標(biāo)志物很難高效地進(jìn)入外周血液循環(huán)，因此CSF樣本相比于血清樣本能為AD臨床診斷提供更多有價值的信息[10]。CSF中Aβ42含量下降是最早出現(xiàn)的改變，通常在患者出現(xiàn)顯著的認(rèn)知障礙前若干年即可檢出，而且具有很高的診斷靈敏度，因此在AD的早期篩查方面具有很大價值[11]。針對于AD標(biāo)志物的診斷試劑盒產(chǎn)品，已有多家企業(yè)拿到醫(yī)療注冊證，成為競相開發(fā)的熱點(diǎn)項目。
博奧森AD標(biāo)志物原料介紹
鑒于阿爾茨海病 (AD) 標(biāo)志物一般大部分的位點(diǎn)識別難，且不容易獲得臨床樣本和標(biāo)準(zhǔn)品，因此AD標(biāo)志物IVD原料的開發(fā)相對于常規(guī)IVD原料開發(fā)顯得更加的困難。二十年來，北京博奧森生物技術(shù)有限公司（Bioss）從未放棄對AD標(biāo)志物原料的研發(fā)，步步優(yōu)化、不斷升級，現(xiàn)已推出成熟IVD配對抗體產(chǎn)品。
博奧森Aβ系列IVD抗體
與Aβ42的下降相比，CSF中總Tau和p-Tau顯著上升發(fā)生在疾病進(jìn)程中較晚的時間點(diǎn)，與臨床可檢出的癡呆癥狀出現(xiàn)的時間非常接近[11]。因此，Tau蛋白相關(guān)的生物標(biāo)志物很難在AD早期篩查中發(fā)揮關(guān)鍵作用。檢測CSF中Tau的意義在于彌補(bǔ)單檢Aβ特異性差的問題。有許多Tau磷酸化位點(diǎn)有希望成為CSF的AD生物標(biāo)志物，研究較多的是蘇氨酸181磷酸化的tau (p-Tau181)。同時檢測CSF中Aβ42、總Tau和p-Tau181聯(lián)合判讀診斷法經(jīng)多年優(yōu)化后，敏感度和特異性均穩(wěn)定達(dá)到80%的閾值[12]。
博奧森Tau系列IVD抗體
NF-L是神經(jīng)元完整性的另一個重要標(biāo)志物，它反映了腦白質(zhì)中軸突的損傷情況。因此，NF-L被認(rèn)為是包括AD在內(nèi)，多種神經(jīng)退行性疾病的重要標(biāo)志物[13-15]。由于NF-L水平與神經(jīng)細(xì)胞的損傷情況高度相關(guān)，CSF中NF-L含量與經(jīng)典指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用可進(jìn)一步提高診斷特異性和敏感度，并為AD病理發(fā)展階的劃分提供更多依據(jù)[16]。此外，NF-L是目前唯一一個被證明能直接從腦脊液轉(zhuǎn)移到血漿的標(biāo)志物[17]。因此，抽取CSF之前檢測患者的血清NF-L水平，很可能成為減少患者痛苦、提高醫(yī)療資源使用效率的更好方法。
博奧森NF-L系列IVD抗體
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