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新品上市丨Bioss助您解決“膠”慮 WB條帶更加清晰
發(fā)表者:北京博奧森生物      發(fā)表時(shí)間:2023-5-16


“梯度膠的各種試劑濃度讓人頭暈眼花;一次配四塊膠,手忙腳亂一上午時(shí)間就過(guò)完了;

可以保溫杯里泡枸杞,卻拯救不了配膠試劑影響身體;

辛辛苦苦制完膠,怎么又出現(xiàn)漏膠/凝膠太慢/膠孔殘缺,今天又要加班了;

條帶歪歪扭扭,難入導(dǎo)師法眼,唉,又要重新來(lái)過(guò)?!?/span>這是不是也是你在做WB時(shí)的感嘆?

快來(lái)看看Bioss全新推出的Precast Gels (Bis-Tris, MOPS)蛋白預(yù)制膠,Bioss助您解決“膠”慮,讓W(xué)B條帶更加清晰。


產(chǎn)品信息:

    本產(chǎn)品為Bis-Tris聚丙烯酰胺電泳預(yù)制凝膠,可用于蛋白質(zhì)分離實(shí)驗(yàn),單片膠為15孔,每孔最大上樣量為25 μl,推薦上樣量10-15 μl。獨(dú)特的凝膠緩沖配方使蛋白電泳條帶更為清晰,銳利,均勻,分辨率更高;配套的MOPS Running Buffer為中性緩沖液,可以提高凝膠穩(wěn)定性,并避免蛋白在電泳過(guò)程中的再修飾。(注:電泳推薦使用配套贈(zèng)送的MOPS running buffer,對(duì)于小分子量蛋白,也可使用MES緩沖液。請(qǐng)勿使用Tris-Glycine Running Buffer代替,電泳緩沖液反復(fù)使用次數(shù)建議不超過(guò)3次)


預(yù)制膠選擇指南

在蛋白實(shí)驗(yàn)中,通常使用固定濃度膠梯度膠兩種,與固定濃度膠相比,顯然梯度膠具有更大優(yōu)勢(shì)。首先,梯度膠的分離范圍更寬,可以同時(shí)分離較大范圍分子量的蛋白質(zhì)。梯度膠的頂部孔徑較大,底部孔徑較小,分子量較大的蛋白質(zhì)可以在凝膠頂部大孔徑部分得到分離,同時(shí)分子量較小的蛋白質(zhì)可以在凝膠底部小孔徑部分得到分離。

另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是梯度膠可以分辨分子量相差較小,在固定濃度膠中不能分辨的蛋白質(zhì)。電泳過(guò)程中,蛋白質(zhì)在梯度膠中遷移,經(jīng)過(guò)的孔徑越來(lái)越小,直到凝膠的孔徑不能通透,這樣電泳過(guò)程中蛋白質(zhì)就被濃縮,集中在一個(gè)很窄的區(qū)帶中。而分子量略小的蛋白質(zhì)可以遷移得更靠前一些,被集中在略前面的區(qū)帶中。由于梯度凝膠孔徑逐步變小,在蛋白質(zhì)不能通透的孔徑附近對(duì)蛋白有濃縮作用,所以電泳后形成很窄的區(qū)帶,可以分辨出分子量相差較小的蛋白質(zhì)。

在蛋白分離范圍相同的情況下,梯度膠的選擇主要取決于目的蛋白的大小,雖然都可以分離10-250 kD的蛋白,但濃度為4-12%的梯度膠對(duì)55 kD以上的蛋白分離效果更好,而濃度為4-20%的梯度膠則更利于分離55 kD以下的蛋白。

凝膠分離范圍


產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)及常見(jiàn)問(wèn)題解答

 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

1.方便:即開即用,無(wú)需配制溶液和灌膠操作,附送足量的電泳緩沖液,簡(jiǎn)化操作步驟,縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,每天都有新結(jié)果;

2.快捷:電泳時(shí)間短,在150V電壓下,電泳40-50分鐘即可完成,再也不用熬夜做WB啦;

3.安全:無(wú)需接觸有毒、刺激性試劑,和屏住呼吸加試劑say byebye;

4.兼容性強(qiáng):兼容目前市場(chǎng)各種電泳槽,無(wú)論是BIORAD,天能還是君意東方,通通百搭;

5.應(yīng)用廣泛:SDS變性及非變性電泳一膠搞定;

6.重復(fù)性好:通過(guò)全自動(dòng)、大規(guī)模的凝膠灌注技術(shù),品質(zhì)穩(wěn)定,保證每片膠之間良好的重復(fù)性,重復(fù)實(shí)驗(yàn)補(bǔ)數(shù)據(jù)也不怕;

7.結(jié)果清晰:獨(dú)特的凝膠緩沖配方使蛋白電泳條帶更為清晰,銳利,均勻,分辨率更高;配套的MOPS Running Buffer為中性緩沖液,可以提高凝膠穩(wěn)定性并避免蛋白在電泳過(guò)程中的再修飾。條帶平整、清晰、銳利,無(wú)邊緣效應(yīng),讓你的WB結(jié)果張張精品。


 常見(jiàn)問(wèn)題解答:

1.指示劑偏斜

可能原因:電泳槽漏液

解決辦法:調(diào)整膠板位置,檢查密封條。

2.蛋白條帶拖尾

可能原因:樣品溶解不佳或者降解

解決辦法:樣品加熱,離心取上清或重新制備新鮮樣品

3.指示劑呈倒三角狀,即兩邊低、中間高,形成峰頂

可能原因:內(nèi)、外槽電泳液量不夠

解決辦法:補(bǔ)滿內(nèi)槽電泳液,外槽電泳液補(bǔ)至2/3高度。

4.指示劑出現(xiàn)弧度

可能原因:底部出口被電泳槽上膠條部分覆蓋或者膠板底部沒(méi)卡緊

解決辦法:調(diào)整膠板位置,避免底部出口和膠條重合。

5.上半部分蛋白條帶無(wú)端消失

可能原因:內(nèi)槽或樣品被蛋白酶污染

解決辦法:清洗實(shí)驗(yàn)相關(guān)試劑、儀器,避免被蛋白酶污染。

6.WB曝光圖蛋白條帶不完整

可能原因:濕轉(zhuǎn)時(shí)海綿里面有氣泡沒(méi)有排干凈或者夾子沒(méi)夾緊

解決辦法:將海綿里面的氣泡排干凈;調(diào)整夾子的位置。

7.樣品條帶在凝膠中擴(kuò)散狀

可能原因:樣品含鹽類過(guò)多

解決辦法:采用透析或者超濾除鹽。


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