流式細(xì)胞分選技術(shù)服務(wù)服務(wù)編號(hào)：SV1401
一、簡(jiǎn)介/定義
細(xì)胞分選(cell sorting)是根據(jù)細(xì)胞所具有的特性將某種特定的細(xì)胞亞群從混合的細(xì)胞樣品中分離出來(lái)的一種技術(shù)。
流式細(xì)胞分選(Flow cytometry sorting)是在流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表型的基礎(chǔ)上，使用充電分選技術(shù)以實(shí)現(xiàn)多種特定表型細(xì)胞的鑒定、分類、定量和分離。具有分選參數(shù)多、群體多、純度高、靈活性強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)。分選后細(xì)胞可做進(jìn)一步生物學(xué)研究如單細(xì)胞測(cè)序等。
活細(xì)胞的熒光激活細(xì)胞分選(FACS)根據(jù)熒光標(biāo)記將細(xì)胞群分成亞群。與非分選流式分析相比，流式細(xì)胞分選涉及更復(fù)雜的機(jī)制。使用熒光偶聯(lián)抗體染色的細(xì)胞可以根據(jù)它們所染色的熒光團(tuán)而彼此分離。例如，表達(dá)一種細(xì)胞標(biāo)記物的細(xì)胞可以使用識(shí)別該標(biāo)記物的FITC偶聯(lián)的抗體來(lái)標(biāo)記，而表達(dá)不同標(biāo)記物的另一種細(xì)胞類型可以使用對(duì)該標(biāo)記物特異的PE偶聯(lián)的抗體來(lái)標(biāo)記。流式細(xì)胞分選可基于不同的熒光標(biāo)記將不同類型的細(xì)胞分離，這就是流式細(xì)胞分選術(shù)的基本原理。
二、 設(shè)備特點(diǎn)
Invitrogen? Bigfoot全光譜流式細(xì)胞分選儀配有Sasquatch軟件(SQS)，可提供創(chuàng)新、易用、高速、安全的細(xì)胞分選，滿足您所在實(shí)驗(yàn)室當(dāng)前和未來(lái)的研究需求。具有更高的靈敏度、分辨率，更高的分選效率，配置有4個(gè)激光器，27個(gè)檢測(cè)通道，可進(jìn)行復(fù)雜的分選。
三、 儀器配置
四、 服務(wù)流程
1. Tip: 請(qǐng)您填寫項(xiàng)目申請(qǐng)表，以便我們?yōu)槟峁└玫募夹g(shù)服務(wù)。
2. 客戶提交流式細(xì)胞分選檢測(cè)請(qǐng)求與實(shí)驗(yàn)要求，與公司商定具體的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、數(shù)量和費(fèi)用，雙方簽訂《委托流式細(xì)胞分選檢測(cè)服務(wù)合同書(shū)》。
3. 客戶提供檢測(cè)樣品，我公司按照協(xié)定要求安排檢測(cè)項(xiàng)目預(yù)實(shí)驗(yàn)，雙方根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果商定實(shí)驗(yàn)技術(shù)參數(shù)細(xì)節(jié)。
4. 公司實(shí)驗(yàn)室正式開(kāi)展檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)向客戶提交實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和檢測(cè)報(bào)告。
五、 送樣要求
1. 樣品濃度：細(xì)胞需無(wú)菌，細(xì)胞濃度不少于1-10×106 cells/ml。
2. 樣品體積：1-2ml/管，至少需要500μl/管。
3. 注意：
（1） 保證樣本的無(wú)菌狀態(tài)，因?yàn)榉诌x得到的細(xì)胞還要繼續(xù)培養(yǎng)；
（2） 不能使用固定劑固定細(xì)胞，因?yàn)榛罴?xì)胞經(jīng)固定劑處理后即死亡；
（3） 保證上機(jī)樣品為單細(xì)胞懸液；
（4） 準(zhǔn)備充足的細(xì)胞；
（5） 建議分選上樣管中的緩沖液使用含2% FBS的PBS，普通培養(yǎng)基中的酚紅可能會(huì)干擾分選；若用培養(yǎng)基的話，顏色不能太深，血清濃度不能超過(guò)2%，否則粘性太大影響分選；
（6） 如要分選GFP等轉(zhuǎn)染的樣品，請(qǐng)?zhí)峁┪唇?jīng)轉(zhuǎn)染的相同細(xì)胞為陰性對(duì)照；
（7） 如要做多重?zé)晒馊旧珮?biāo)本的分選，請(qǐng)務(wù)必準(zhǔn)備未經(jīng)染色（或染有Isotype）及單染（單陽(yáng)）樣品，以便做檢測(cè)前補(bǔ)償校正用；
（8） 如要去除死細(xì)胞，在不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)前提下，可以加入7-AAD或是PI；
（9） 由于在分選過(guò)程中，樣本可能通過(guò)液滴震蕩產(chǎn)生氣溶膠，所以不接受含有會(huì)傳播人類病原微生物的生物有害樣本，也不接受含放射性生物樣品；
（10） 需告知細(xì)胞的大小與形態(tài)，以便選擇合適的噴嘴。所分選細(xì)胞的直徑最好小于噴嘴直徑的1/5，至少小于1/3。本機(jī)常規(guī)裝載100μm噴嘴，如有特殊需要，請(qǐng)?zhí)崆芭cbioss（博奧森）技術(shù)人員溝通；
（11） 低含量細(xì)胞（占1%以下）的分選會(huì)導(dǎo)致低純度及低回收率。因此，我們建議事先富集你感興趣的細(xì)胞；
（12） 本儀器以分選為主，單純的流式分析實(shí)驗(yàn)建議咨詢流式分型技術(shù)服務(wù)，分選前最好先使用其它流式細(xì)胞儀確認(rèn)細(xì)胞陽(yáng)性染色比例。
五、服務(wù)時(shí)間
周一到周五 9:00--17:00（提前一天預(yù)約），實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告一周內(nèi)提供，具體周期根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容而定。
六、收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
請(qǐng)聯(lián)系負(fù)責(zé)人詢價(jià)。
七、案例展示
